Purifikácia proteínov
Purifikujeme proteíny na troch systémoch ÄKTA – od jednoduchých afinitných krokov po automatKódizované viacstupňové protokoly a vývoj metód v softvéri UNICORN. Zahustenie a výmenu pufra vo väčších objemoch robíme tangenciálnou filtráciou.
| Kód | Služba | Typické použitie | Pracovisko |
|---|---|---|---|
| C1 | Afinitná chromatografia (IMAC/His-tag, GST, MBP, Proteín A/G) | Záchyt cieľového proteínu z lyzátu alebo media | KMB, VP UK |
| C2 | Iónovo-výmenná chromatografia (AEX, CEX) | Medzistupeň, odstránenie DNA, endotoxínov a izoforiem | KMB, VP UK |
| C3 | Hydrofóbna interakčná chromatografia (HIC) | Separácia agregátov a variantov proteínu | KMB, VP UK |
| C4 | Gélová filtrácia (SEC), odsolenie, výmena pufra | Finálne dočistenie, stanovenie oligomerného stavu | KMB, VP UK |
| C5 | Automatizovaná viacstupňová purifikácia | Záchyt – medzistupeň – dočistenie v jednom behu | KMB, VP UK |
| C6 | Vývoj a optimalizácia metódy (skríning kolón a pufrov, DoE) | Robustný purifikačný protokol | KMB, VP UK |
| C7 | Preparatívna purifikácia (prietok do 150 ml/min) | Väčšie množstvá proteínu pre študie a pilotné aplikácie | VP UK |
| C8 | Tangenciálna filtrácia – zahustenie, diafiltrácia, čírenie (UF/DF, MF) | Zahustený proteín v cieľovom pufri, vyčirená kultivačná tekutina | KMB, VP UK |
| C9 | Základná purifikácia a školenie na ÄKTA start | Jednoduché afinitné a odsoľovacie kroky, výuka | KMB |